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Négociations multiples

Pour que c-ftz-Δi ne soit pas dégradé de manière co-traductionnelle, j’ai traité le muscle avec la substance de traduction homoharringtonine (HHT) pour qu’il possède 31 minutes juste avant d’insérer des plasmides contenant MHC-ftz-Δi ou c-ftz-Δi. Les procédures HHT n’ont eu aucun effet sur le niveau d’exportation atomique des deux ARNm (Fig. S2A et vous pouvez B). Pour vous assurer que la traduction est limitée, j’ai profité du fait que le nouveau journaliste ftz code une protéine fusionnée avec un épitope HA et vous pouvez immunocolorer les tissus injectés par MHC-ftz-Δi.

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Juste après avoir incubé les nouveaux tissus au temps approprié à 37 ° C, ils ont été lavés deux fois avec une solution saline à barrière de phosphate (PBS) et vous pouvez les réparer à l’intérieur de 4% de paraformaldéhyde (Electron Microscopy Sciences) à l’intérieur du PBS pendant 15 minutes. Le tissu a ensuite été perméabilisé en utilisant 0,1% de TritonX-100 dans du PBS (Thermo Medical). Dans les études HHT, les tissus ont été traités avec 5 µM de HHT (sinon du DMSO depuis la manipulation) 30 minutes juste avant les microinjections. Immédiatement après 20 minutes, le nouvel inhibiteur de l’ARN PolII, l’α-amanitine, est mis en état d’arrêter la transcription ultérieure. Les cellules ont été laissées pendant deux heures pour permettre l’exportation du plus récent ARNm récemment synthétisé. Étonnamment, le nouveau MHC SSCR commercialisait l’exportation à partir de βG, cependant, celle-ci était considérablement plus faible que l’épissage promu à l’exportation (contraste MHC-βG-Δi, βG-Δi, et vous obtiendrez βG-i, Fig. 2B et vous pourrez C).

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Ce médicament inhibe donc entièrement la transcription des plasmides micro-injectés en 5 minutes.29 J’ai ensuite surveillé le dernier envoi du MHC-ftz-Δi aux différents éléments de sortie une fois la transcription fermée. Nous utilisons un cryptage robuste et vous appliquerez des protocoles de sécurité stricts pour renforcer la protection la plus récente contre les comptes, les transactions et les analyses privées des utilisateurs. Trade Alrex i700 accueille tous les traders, quelles que soient ses options. Qu’il s’agisse d’un inexpérimenté entrant dans le nouveau monde du commerce ou d’un bon professionnel cherchant à améliorer ses performances grâce à un logiciel d’échange, notre organisme s’adapte à vos besoins. Une fois vos suggestions vérifiées, un dépôt initial de 250 $ établit la phase la plus récente pour les entreprises commerciales. Nous offrons un service client complet grâce à plusieurs canaux et adresses e-mail, une conversation en temps réel et vous disposez d’un portail d’assistance exclusif pour toutes nos pages Web.

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